که در آن ویسکوزیته ذاتی محلول می‌باشد و از رابطه زیر به دست می‌آید:

(۲-۵)

 

: وزن مولکولی پلیاتیلنگلایکول که به میزان %۹۰ توسط غشا پس زده میشود
: ویسکوزیته ذاتی محلول
: ضریب تناسبی ثابت بین شعاع کره معادل و شعاع چرخش مولکول پلیمر (برابر ۱ در نظر گرفته می‌شود)؛
: عدد آووگادرو

۲-۸-۱ اندازهگیری غلظت پلیاتیلنگلایکول

 

به منظور اندازه‌گیری غلظت محلولهای پلیاتیلنگلایکول که در محاسبه آستانه شکست به کار برده می‌شود، از روش اسپکتروفوتومتری استفاده میشود. واکنشگرهای مورد استفاده در تعیین غلظت پلیاتیلنگلایکول عبارتند از:

واکنشگر اول: %۵ (وزنی/حجمی) BaCl₂ در محلول ۱ نرمال HCl (۱۰۰ میلیلیتر)
واکنشگر دوم: %۲ (وزنی/حجمی) KI که ۱۰ مرتبه رقیق شده باشد + ۲۷/۱ گرم I₂
۴ میلیلیتر از محلول نمونه به ۱ میلیلیتر از واکنشگر اول اضافه می‌شود. سپس ۱ میلیلیتر از واکنشگر دوم به این ترکیب اضافه می‌شود.
محلول حاصله ۱۵ دقیقه در دمای اتاق نگه داشته می‌شود تا رنگ نهایی آن آشکار شود، سپس جذب محلول رنگی حاصله با بهره گرفتن از اسپکتروفوتومتر در طول موج ۵۳۵ نانومتر در برابر واکنشگر خام اندازه‌گیری میشود [۶۳]، که برای نمونه خام یا شاهد از آب مقطر به جای محلول پلیاتیلنگلایکول استفاده میشود.

مکانیسم انجام این فرایند و نقش هر یک از مواد در آن به این شکل است که واکنشگر اول شامل کلریدباریم و اسیدکلریدریک نقش یک محلول تامپون را داشته و برای حفظ pH محلول استفاده میشود. واکنشگر دوم شامل یونهای میباشد که یونهای مذکور ایجاد یک محلول بنفش رنگ میکنند و شدت و ضعف این رنگ در طی واکنش با پلیاتیلنگلایکول، معیار سنجش غلظت میباشد. با اضافه کردن دو واکنشگر به محلول پلیاتیلنگلایکول، بین یونهای و زنجیرههای پلیاتیلنگلایکول واکنش اکسیداسیون و احیا اتفاق میافتد. نتیجه انجام این واکنش و تولید یونهای بی رنگ ، احیا شدن پلیاتیلنگلایکول و در نهایت کاهش شدت رنگ محلول میباشد.

(۲-۶)

 

به طور کیفی میتوان گفت که هر چه غلظت پلیاتیلنگلایکول در محلول بیشتر باشد تعداد بیشتری از یونهای درگیر واکنش اکسیداسیون-احیا میشود و در نتیجه شدت رنگ محلول کاهش مییابد. برای بررسی کیفی واکنش، شدت رنگ نمونه از طریق منحنی کالیبراسیون به غلظت پلیاتیلنگلایکول مربوط میشود]۵۹[.

۲-۹ بررسی میزان گرفتگی غشا

برای اندازه گیری میزان گرفتگی در غشا ساخته شده، ابتدا شار آب خالص به مدت ۷۵ دقیقه اندازه گیری شد که این مقدار با J_w1 نشان داده شده است. سپس شار پلی اکریل آمید با غلظت ppm100 در مدت ۱۵۰ دقیقه، در فشار ۳ بار و دمای ۲۵ درجه سلسیوس اندازه گیری شد که این مقدار با J_p نشان داده شده است. سپس غشا توسط آب خالص شسته شده . پس از آن نیز شار آب خالص مجدد اندازه گیری شد که این مقدار با J_w2 نشان داده شده است.
یکی از معیارهای تعیین میزان گرفتگی عامل نسبت بازیابی شار(FRR) است که نحوه محاسبه آن در رابطه(۲-۴) آمده است.
(۲-۷) FRR(%)=
به طور کلی هرچه FRR بیشتر باشد خاصیت ضد گرفتگی غشا بهتر خواهد بود]۶۴[.
مقاومت شکل گرفته در حین فرایند فیلتراسیون گرفتگی در غشارا نشان می‌دهد. گرفتگی در غشا میتواند بر اثر تشکیل کیک یا ژل بر روی سطح غشا و جذب روی سطح و یا درون روزنه های غشا باشد. میزان گرفتگی کلی با R_t نشان داده شده است و از رابطه زیر بدست می‌آید.
(۲-۸) R_t=
در ادامه گرفتگی برگشت پذیر(R_r) و گرفتگی برگشت ناپذیر(R_ir) از روابط زیر محاسبه شده‌اند
(۲-۹) R_r=
R_ir= (۲-۱۰)

۲- ۱۰ بررسی مورفولوژی غشا

در انتها لازم است مورفولوژی یا همان ریخت شناسی غشاهای تهیه شده مورد شناسایی قرار گیرند تا مشخصات ساختاری و شیمی- فیزیکی آن ها تعیین شود. این شناسایی در ابتدا موجب اطمینان از انجام واکنش های انجام شده میشود و در ادامه با در اختیار داشتن این اطلاعات میتوان به توجیه رفتار فرآیندی غشا پرداخت.

۲-۱۰-۱ بررسی مورفولوژی غشای تهیه شده با میکروسکوپ الکترونی روبشی(SEM)

مورفولوژی سطح غشا مورد بررسی قرار گرفته است. نمونه های غشا خام تهیه شده از پلی اکریلو نیتریل با ۱۶% الیاف ، غشا هیدرولیز شده و اصلاح حرارتی شده ، غشا اصلاح شده با نانوذرات تیتانیوم دی اکسید با دو روش خود آرایی و مخلوط کردن در محلول پلیمری مورد آنالیز میکروسکوپ الکترونی روبشی قرار گرفته است. برای آنالیزها با این نوع میکروسکوپ نیاز است تا سطح غشا با نانوذرات طلا پوشش داده شود.
میکروسکوپ الکترونی روبشی معمولاً برای تهیه تصاویر از سطوح با بزرگنمایی بین ۱۰ تا ۱۰۰۰۰۰ برابر با قدرت تفکیک در حد ۳ تا ۱۰۰ نانومتر استفاده میشود. از این میکروسکوپ میتوان برای مشاهده حوزه ها در مواد فرومغناطیس، ارزیابی بلورشناسی ذاتی با قطرهایی به کوچکی ۲ تا ۱۰ میکرومتر، شناسایی مشخصات شیمیایی اجزایی به کوچکی چند میکرون روی سطح نمونه ها و ارزیابی گرادیان ترکیب شیمیایی روی سطح نمونه های هادی و غیرهادی در فاصله ای به کوچکی یک میکرومتر استفاده نمود.
مواردی که در این آزمون مد نظر بود عبارتند از:
مورفولوژی سطح غشا
میزان و توزیع نانوذرات روی سطح غشا

 

 

 

 

شناخت نقش تبلیغات بازرگانی در مدیریت بدن.

 

 

•  

 

 

 

 

 

•  

 

 

•  

 

 

• اهداف جزیی:

 

 

 

 

 

 

که بر اساس متغییرها و مفاهیم تحقیق شکل می گیرد عبارتند از:

 

 

• شناخت نقش میزان استفاده از تبلیغات بازرگانی در مدیریت بدن.

 

 

 

• شناخت نقش تصور از بدن در مدیریت بدن.

 

 

 

• شناخت نقش جنس در رابطه میان تبلیغات بازرگانی و مدیریت بدن.

 

 

 

• شناخت نقش سن در رابطه میان تبلیغات بازرگانی و مدیریت بدن

 

 

 

• شناخت نقش وضع تاهل در رابطه میان تبلیغات بازرگانی و مدیریت بدن

 

 

 

• شناخت نقش تحصیلات در رابطه میان تبلیغات بازرگانی و مدیریت بدن).

 

 

فصل دوم:
ادبیات نظری تحقیق
مقدمه
در این فصل بر آن هستیم تا ادبیات نظری و پژوهشی مرتبط با مفهوم تبلیغات و مدیریت بدن را ارائه نماییم؛ در این فصل پس از نگاهی به تاریخچه تبلیغات و مدیریت بدن در جهان و ایران (هرکدام به‌صورت مجزا) سعی کرده‌ایم از جدیدترین منابعِ مربوطه استفاده کنیم. بدین منظور در گامِ اول، فصل حاضر را به دو قسمت ادبیات نظری متغییر مستقل (تبلیغات) و متغییر وابسته (مدیریت بدن) منفک کردیم که هرکدام از این دو بخش نیز خود چند زیرمجموعه را شامل می شود. در گام دوم، پیشینه‌های تجربیِ را به داخلی و خارجی، سپس هر کدام را به چند بخشِ پایان‌نامه‌ها و مقاله‌ها تقسیم‌بندی نموده‌ایم تا به ارزیابی و وضوح بیشتری تأکید کنیم و نیز بر نو بودن دیدگاه پایان‌نامه‌ی حاضر تأکید شود. در گام سوم، چارچوب نظری را مطرح خواهیم کرد که با بررسی نگرش‌های گوناگون در ارتباط با تبلیغات و مدیریت بدن این امکان را می‌‌یابیم تا چارچوب مناسبی جهت تحلیل انتخاب شود. در این مرحله با بهره گرفتن از چارچوب نظری، فرضیه‌های اساسی پژوهش، متغییرها، روابط میان آنها مشخص می‌گردد. همچنین سعی نموده‌ایم تا بحث را با عینِ بهره‌گیری از منابع نظری انجام‌شده، بر نقاط ضعف و نادیده انگاشته شده (در کارهایِ تجربیِ در ارتباطات و جامعه‌شناسی) تأکید نماییم و نیز ارتباط نظری ارتباطِ مفاهیم را نشان خواهیم داد. در گام چهارم، با الهام از مباحثِ عنوان‌ شده در این فصل، مدلِ نظریِ مورد عنایت واقع‌شده در این فصل را در قالب نمودار ترسیم کنیم، این همان کاری است که اندیشمندان عرصه‌ی پژوهش و نظریه بر آن تأکید زیادی دارند تا همزمان هم بینشِ نظری و هم استراتژیِ پژوهش مشخص شود (بنگرید به دواس، ۱۳۸۹؛ بلیکی، ۱۳۸۴).
۲-۱- تاریخچه موضوع
۲-۱-۱- تاریخچه تبلیغات بازرگانی در جهان
بدون شک، تبلیغ، پدیده‌ای نیست که در یک لحظه بوجود آمده باشد، بلکه کاری است که قدمت آن به قدمت خود انسان است (سُکری،۱۳۷۰: ­۹۶). متاسفانه اطلاع کامل و دقیقی از تبلیغات اولیه در دست نیست. ولی حفاری‌هایی که در کشورهای سواحل جنوبی دریای مدیترانه شده، این نکته را روشن می‌سازد که رومی‌ها و برخی از اسلافشان با نوعی تبلیغ سروکار داشته اند. مورخان نیز این حقیقت را تایید می‌کنند که در قرون وسطی بازرگانان برای ترویج و شناساندن متاع خود از وسایلی چند استفاده می‌کردند (اربابی،۱۳۵۲: ­۵۹).

با این وجود سال ۱۴۵۰ یک واقعه مهم در ارتباطات و تبلیغات است سالی که در صنعت چاپ انقلاب مهمی اتفاق افتاد و در حقیقت زندگی انسان‌ها را از لحاظ کیفی به شدت تحت تاثیر قرار داد. با اختراع چاپ و کهکشان گوتنبرگ، با همگانی تر شدن سواد و امکان تکثیر آگهی ها، تبلیغات وارد مرحله جدیدی شد که بسیاری از صاحب نظران آغاز و تولد تبلیغات را از همین مرحله می دانند ( ولز،۱۳۸۳: ­۶۷ ). بررسی و ارزیابی تبلیغات، عمدتا پس از پیدایش صنعت چاپ و از لحاظ زمانی بویژه در سده‌های اخیر مورد توجه پژوهشگران و دانشمندان قرار گرفته است (ترابی،۱۳۸۱: ­۸).
افکار و اندیشه های انسان تکثیر شد و امکان ارائه پیام‌های گوناگون و از آن جمله تبلیغات به‌طور گسترده‌تری میسر گردید؛ بخصوص آنکه بخش عمده‌ای از کتاب‌های چاپ‌ شده اولیه را موضوعات تبلیغات سیاسی و مذهبی تشکیل می‌داد. نگاهی به تاریخ تبلیغات نشان می دهد که تبلیغات سه شکل عمده داشته است:

 

 

• تبلیغات مذهبی

 

 

 

• تبلیغات سیاسی

 

 

 

• تبلیغات اقتصادی(بازرگانی) (یحیایی ایله‌ای،۱۳۸۹: ۱۹- ۱۸).

 

 

تا زمان وقوع رنسانس فرهنگی در اروپا وجه قالب تبلیغات مذهبی بوده، در انگلیس آگهی‌هایی یافت شده اند که در گذشته بر دیوارهای کلیسا نصب می‌شدند تا فروش یک کتاب دعا را تبلیغ کنند (افخمی،۱۳۹۰: ۸۲). اما از آن زمان تا اوایل قرن بیستم، تبلیغات سیاسی جایگزین یا وجه قالب تبلیغات گردید. با اختراع و توسعه تلویزیون و بخصوص با رونق اقتصادی و توسعه تولید انبوه کالاها از اوایل قرن بیستم تبلیغات اقتصادی و بازرگانی با سرعت جایگزین انواع دیگر تبلیغات گردید (یحیایی ایله‌ای،۱۳۸۹: ­۱۹). از سال ۱۹۲۰ نیز تدریس تبلیغ در دانشگاه آغاز گردید. با تولد تلویزیون به عنوان بزرگ‌ترین رسانه تبلیغاتی جهان و مهمترین شاخص دهکده جهانی، تبلیغات به شکوفایی و گسترش معجزه آسایی رسیده است به طوری که سال ۱۹۵۰ به بعد را می توان به هیچ مجامله‌ای عصر طلایی تبلیغات نامید که دوران حاضر را نیز شامل می شود. تلویزیون از همان اول کار خود را با آگهی شروع نمود و تغییر عمیقی در فرم و شکل کار و عملیات موسسات تبلیغاتی بوجود آورد (اربابی،۱۳۵۲: ۶۵-­۶۴).
یکی از آخرین و مهمترین گامها در دهه ۱۹۶۰ پس از دستیابی بشر به فضا برداشته شد. به این صورت که با فرستادن ماهواره‌های مصنوعی به مدار کره‌ی زمین تسهیلات گسترده‌ای برای تسریع در امر ارتباطات بوجود آمد. به این ترتیب با توسل به این تسهیلات راه برای پیدایش شبکه‌ی گسترده‌‌ی امپریالسم خبری گشوده شد و خبرگزاری‌های غربی از امکانات تازه‌ای برخوردار شدند و شبکه رادیو و تلویزیون‌ها گسترش شگفت‌انگیزی پیدا کرد تا حدی که امروز کشورهای زیادی هستند که با ده‌ها زبان غیر از زبان ملی کشور خود برنامه‌ی برون‌مرزی پخش می‌کنند و روزنامه‌ها با تیراژهای میلیونی چهره‌ی دیگری از امکانات تبلیغاتی را نشان می دهد (زورق،۱۳۶۸: ­۱۶۷).
ظهور اینترنت و فراگیر شدن آن در دهه هشتاد قرن بیستم (از قرن ۱۹۸۰ به‌بعد) آغاز مرحله جدیدی از ارتباطات و ظهور ارتباطات بین‌المللی و توسعه تبلیغات بازرگانی فراتر از مرزهای جغرافیایی است. ارتباطات توسعه یافته و تبلیغات به طبع آن مجبور به توسعه است. با پیدایش فناوری‌های نوینِ اطلاعاتی و ارتباطی همچون اینترنت، ماهواره، تلفن همراه، رایانه و ویدئو، انقلابی عظیم در عرصه ارتباطات دوربرد و الکترونیک با برد جهانی رخ داد. در بین این فناوری ها، ماهواره و اینترنت شاخص ترین و اصلی ترین آن ها شناخته شده اند(کوهی و حسنی،۱۳۹۱: ۱۱۱).

قرار دادن منابع ژنتیکی برای غذا و کشاورزی مذکور در بند (۳)، در نظام چند جانبه

را ارزیابی خواهند نمود. به دنبال این ارزیابی هیأت رئیسه تصمیم خواهد گرفت که آیا
دسترسی آسان به آندسته از افراد حقیقی و حقوقی موضوع بند (۳) که منابع ژنتیکی
گیاهی برای غذا و کشاورزی را در نظام چند جانبه قرار نداده‌اند ادامه یابد، یا
ترتیبات دیگری که مقتضی بنظر میرسند اتخاذ گردد.
۵ - سیستم چند جانبه، منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و کشاورزی را که در پیوست (۱)
فهرست شده و به گونه‌ای که در جزء (الف) بند (۱) ماده (۱۵) پیش بینی شده در مجموعه
خارج از رویشگاه طبیعی مراکز تحقیقات کشاورزی بین‌المللی گروه مشورتی تحقیقات
کشاورزی بین‌المللی و طبق بند (۵) ماده (۱۵) در مؤسسات بین‌المللی دیگر نگهداری
میشوند نیز در بر خواهد گرفت.
ماده ۱۲ - دسترسی آسان به منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و کشاورزی در قالب نظام چند
جانبه
۱ - طرفهای متعاهد موافقت میکنند که دسترسی آسان به منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و
کشاورزی در قالب نظام چند جانبه به گونه‌ای که در ماده (۱۱) تعریف شده است، طبق
مفاد این معاهده خواهد بود.
۲ - طرفهای متعاهد موافقت میکنند که اقدامات قانونی و دیگر ترتیبات لازم را برای
فراهم نمودن اینگونه دسترسی به طرفهای متعاهد دیگر از طریق سیستم چند جانبه اتخاذ
کنند. بدین منظور، اینگونه دسترسی برای افراد حقیقی و حقوقی در قلمرو قضائی هر طرف
متعاهد نیز با رعایت مفاد بند (۴) ماده (۱۱) فراهم خواهد داشت.
۳ - این دسترسی طبق شرایط زیر فراهم خواهد شد:
(الف) - دسترسی فقط به منظور استفاده و حفاظت از تحقیقات، اصلاح و آموزش برای غذا و
کشاورزی فراهم خواهد شد، مشروط بر اینکه هدف مزبور شامل استفاده‌های شیمیایی،
دارویی و سایر استفاده‌های صنعتی غیر غذائی / علوفه‌ای نشود. در خصوص گیاهان زراعی
چند منظوره (غذائی و غیر غذائی)، اهمیت آنها برای امنیت غذائی، مبنای وارد کردن
آنها در نظام چند جانبه و فراهم نمودن آنها برای دسترسی آسان میباشد؛
(ب) - دسترسی، به سرعت، بدون نیاز با ردیابی فردی و رایگان خواهد بود یا اگر پولی
دریافت شود نباید بیشتر از حد اقل هزینه لازم باشد؛
(ج) - همه اطلاعات شناسنامه‌ای موجود و با رعایت قوانین حاکم، دیگر اطلاعات توصیفی
و غیر محرمانه موجود مربوط، به همراه منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و کشاورزی در
دسترس قرار خواهد گرفت؛
(د) - دریافت کنندگان، مدعی هیچگونه حق مالکیت معنوی یا حقوق دیگری که موجب
محدودیت دسترسی آسان میگردد بر منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و کشاورزی، قسمتها یا
اجزاء ژنتیکی آنها به صورتیکه از نظام چند جانبه دریافت نموده‌اند نخواهند شد.
(ه) - دسترسی به منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و کشاورزی در دست تهیه از جمله موادی
که توسط کشاورزان در حال ایجاد میباشد، در طول دوره ایجاد، منوط به صلاحدید ایجاد
کنندگان آن است.
(و) - دسترسی به منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و کشاورزی که با حقوق مالکیت معنوی و
حقوق دیگر محافظت گردیده‌اند، طبق موافقتنامه‌های بین‌المللی ذی‌ربط و قوانین ملی
مربوط صورت خواهد گرفت.
(ز) - منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و کشاورزی که در قالب نظام چند جانبه در دسترسی
قرار داده شده و محافظت میگردند، همچنان توسط دریافت کنندگان آن منابع ژنتیکی
گیاهی برای غذا و کشاورزی در نظام چند جانبه به موجب شرایط این معاهده در دسترس
قرار خواهند گرفت؛ و
(ح) - طرفهای متعاهد موافقت میکنند که دسترسی به منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و
کشاورزی در شرایط رویشگاههای اولیه، بدون لطمه زدن به دیگر مقررات به موجب این
ماده، طبق قوانین ملی یا در نبود این قوانین، طبق استانداردهائی که ممکن است توسط
هیأت رئیسه تعیین گردد، فراهم شود.
۴ - بدین منظور، طبق بندهای (۲) و (۳) فوق و به موجب موافقتنامه انتقال مواد
استاندارد که توسط هیأت رئیسه تصویب خواهد شد و حاوی مقررات جزءهای (الف)، (د) و
(ز) بند (۳) ماده (۱۲) و همچنین مقررات تسهیم منافع منردج در ردیف (۲) جزء (د) بند
(۲) ماده (۱۳) و دیگر مقررات مربوط دیگر این معاهده و مقرراتی خواهد بود مبنی بر
اینکه دریافت کننده منابع ژنتیکی گیاهی برای غذا و کشاورزی باید خواستار اعمال

• ۱۰۰ تا ۱۵۰ میکرولیتر از سوسپانسیون باکتریایی بر روی محیط کشت LB جامد حاوی آنتی بیوتیک های مناسب (آمپی سیلین، تتراسایکلین یا زئوسین) کشت داده شد و پلیت ها به مدت ۱۶ ساعت در دمای °C37 گرماگذاری شدند.

 

• پس از گذشت این مدت، از کلنی های تشکیل شده بر روی محیط کشت جامد، ماتریکس سلولی تهیه گردید.

 

۲-۶-۶ بررسی کلونهای نوترکیب به روش سریع

 

• مقدار µl50 از محلول EDTA(10 میلی مولار) به تیوبها اضافه کرده و حدود ۷۰% از ماتریکس باکتریایی را در آن حل نموده و سوسپانسیون را ورتکس نمودیم.

 

• مقدارµl 50 از محلول NSS (پیوست ۴) را به هر تیوب افزوده و به مدت ۳۰ ثانیه ورتکس نمودیم.

 

• تیوب ها را به مدت ۵ دقیقه در حمام آبی°C 70 گرماگذاری نمودیم.

 

• مقدار µl 5/1 از محلول KCl (4 مولار) به تیوب ها اضافه کرده و هر تیوب به مدت ۳۰ ثانیه ورتکس گردیده و سپس به مدت ۵ دقیقه بر روی یخ قرار داده شد.

 

• محتویات هر سلول در دمای ۴ درجه به مدت ۳ دقیقه در g3000 سانتریفوژ گردید.

 

• مایع رویی هر تیوب به تیوب جدید منتقل شد و میزان µl25 از آن بر روی ژل آگارز ۱% برده شد.

 

۲-۶-۷ PCR بر روی کلنی های باکتریایی/ مخمری
با رعایت شرایط استریل، از کلنی های رشد یافته بر روی پلیت ماتریکس، مقداری باکتری برداشته و در مقداری آب دیونیزه استریل حل نموده و به مدت ۵ دقیقه در بن ماری در حال جوش (۱۰۰ درجه سانتی گراد) جوشانده و سپس از این محلول بعنوان الگوی DNA برای انجام PCR بر اساس پروتوکل مندرج در قسمت مربوطه استفاده می شود.

۲-۶-۸ استخراج پلاسمید در مقیاس کم

 

• باکتری E. coli حاوی پلاسمید مورد نظر را به لوله ml5 محیط کشت LB مایع حاوی آنتی بیوتیک مناسب تلقیح کرده و به مدت ۱۶ ساعت (ON) درون شیکر انکوباتور در دمای C°۳۷ با دور ۱۴۰ rpm قرار می دهیم.

 

• سلولهای باکتریایی را با سرعت rpm10000 به مدت ۳ دقیقه جمع آوری می نماییم.

 

• در این مرحله رسوب باکتریایی را می توان در دمای °C20- نگهداری نمود.

 

• رسوب حاصله از مرحله ۳ را در µl100 از محلول شماره ۱ (پیوست ۵) حل می کنیم.

 

• µl200 از محلول شماره ۲ (پیوست ۵) را به محلول حاصل از مرحله قبل اضافه کرده و به مدت ۵ دقیقه درون یخ قرار می دهیم.

 

• µl150 استات سدیم به محلول فوق اضافه کرده و به مدت ۵ دقیقه درون ظرف یخ نگهداری می نماییم.

 

• محلول فوق را در rpm12000 به مدت ۱۰ دقیقه سانتریفوژ می نماییم.

 

• با دقت مایع رویی را به تیوپ دیگری منتقل می کنیم.

 

• هم حجم مایع بدست آمده از مرحله قبل به آن مخلوط فنل، کلروفرم و ایزوآمیل الکل به نسبت ۲۵، ۲۴، ۱ اضافه می کنیم.

 

• محلول را در rpm12000 به مدت ۱۰ دقیقه سانتریفوژ می نماییم.

 

• با دقت مایع رویی را به تیوپ دیگری منتقل می کنیم.

 

• به میزان ml1 اتانول ۹۶% سرد به مایع رویی اضافه کرده و به مدت ۱۶ ساعت (ON) در °C20- نگهداری می نماییم.

 

• نمونه را در rpm12000 به مدت ۱۰ دقیقه سانتریفوژ می نماییم.

 

• به میزان µl750 اتانول ۷۰% سرد به رسوب مرحله قبل اضافه کرده و مشابه با مرحله قبل سانتریفوژ می نماییم.

 

• رسوب بدست آمده را در µl30-20 آب دیونیزه استریل حل می نماییم.

 

۲-۶-۹ استخراج پلاسمید در مقیاس زیاد
برای این کار از روش لیز قلیایی استفاده شد. مراحل انجام این روش به شرح زیر می باشد:

 

• میزان µl450 از محلول آنتی بیوتیکی تتراسایکلین (غلظت نهاییml / µg15) را به ml300 محیط کشت مایع LB اضافه نموده و سپس سلول E. coli TOP10F’ حاوی پلاسمید مورد نظر را به این محیط تلقیح کرده و به مدت ۱۶ ساعت (ON) بر روی شیکر انکوباتور C°۳۷ قرار می دهیم.

 

• محیط کشت به لوله های ۵۰ میلی لیتری منتقل شده و با سرعت rpm10000 به مدت ۴ دقیقه سانتریفوژ می گردد.

 

• پس از انجام سانتریفوژ، محیط کشت رویی تخلیه شده و رسوب سلولی جمع آوری می گردد. در این مرحله می توان رسوب سلولی را در دمای °C 20- نگهداری نمود.

 

• رسوب حاصل از مرحله ۳ را در ml6 از محلول شماره ۱ (پیوست ۵) حل می کنیم.

 

• به مقدار ml12 از محلول شماره ۲ (پیوست ۵) به تیوب فوق اضافه نموده و ۱۰ دقیقه درون یخ قرار می دهیم.

 

• سی میلی لیتر از محلول استات سدیم M3 (2/5pH) به محلول فوق اضافه کرده و به مدت ۳۰ دقیقه درون یخ نگهداری می نماییم.

 

• محلول را به مدت ۱۵ دقیقه در rpm12000 در دمای ۴ درجه سانتیگراد سانتریفوژ می نماییم.

 

• مایع رویی را از گاز استریل عبور داده و به محلول فیلتر شده، ml16 ایزوپروپانول اضافه نموده و به مدت ۱۰ دقیقه در دمای اتاق نگهداری می کنیم. سپس این محلول را در دمای ۴ درجه به مدت ۱۰ دقیقه در rpm12000 سانتریفوژ نموده، مایع رویی را دور ریخته و رسوب حاصله را در دمای اتاق خشک می کنیم.

 

• رسوب خشک شده را در ml1 آب دیونیزه استریل حل کرده و به آن µl40 از محلول RNaseA (mg/ml10) اضافه کرده و به مدت ۱ ساعت در دمای °C37 گرماگذاری می نماییم.

 

• به محلول فوق به نسبت ۱:۱ از فنل و کلروفرم اضافه نموده و به مدت ۱۰ دقیقه در rpm12000 سانتریفوژ می نماییم.

 

• فاز رویی (فاز آبی) را به تیوپ جدید منتقل کرده و دو برابر حجم این فاز، به آن اتانول ۹۶% سرد اضافه نموده و به مدت ۱۶ ساعت (ON) در °C 20- قرار داده و سپس به مدت ۱۰ دقیقه در rpm12000 سانتریفوژمی نماییم.

 

• مایع رویی را دور ریخته و به رسوب حاصل ml1 اتانول ۷۰% سرد اضافه نموده و مجدداً سانتریفوژ می نماییم.

 

• مایع رویی را دور ریخته و رسوب حاصله را در دمای اتاق خشک نموده و سپس در µl150-100 آب دیونیزه حل می کنیم.

جدول شماره ۱۵) توزیع فروانی تعداد اعضاء خانواده
جدول شماره ۱۶) توزیع فروانی زندگی با افراد
جدول شماره ۱۷) توزیع فروانی کمک گرفتن درسی
جدول شماره ۱۸) توزیع فروانی زیر بنای فعلی منزل مسکونی
جدول شماره ۱۹) توزیع فروانی سرپرستی مالی خانواهد
جدول شماره ۲۰) توزیع فروانی توزیع فراوانی وضعیت مسکن
جدول شماره ۲۲) توزیع فروانی توزیع فراوانی محل سکونت
جدول شماره ۲۳) توزیع فروانی توجه به رفع مشکلات
جدول شماره ۲۴) توزیع فروانی میزان نظارت والدین (پدر)
جدول شماره ۲۵) توزیع فروانی میزان تظارت والدین (مادر)
جدول شماره ۲۶) توزیع فروانی رابطه صمیمانه و عاطفی والدین
جدول شماره ۲۷) توزیع فروانی برنامه‌ریزی والدین جهت کنترل درسی فرزندان (پدر)
جدول شماره ۲۸) توزیع فروانی برنامه‌ریزی والدین جهت کنترل درسی فرزندان (مادر )
جدول شماره ۲۹) توزیع فروانی تمایل به درس خواندن
جدول شماره ۳۰) توزیع فروانی وجود شغل مناسب
جدول شماره ۳۱) توزیع فروانی انتخاب شغل دلخواه
جدول شماره ۳۲) توزیع فروانی استفاده از کتابها …
جدول شماره ۳۳) توزیع فروانی استفاده از امکانات برای کمک به حل تمرینها و …

جدول شماره ۳۴) توزیع فروانی استفاده از معلمان خصوصی
جدول شماره ۳۵) توزیع فروانی استفادهاز آموزشگاهها
جدول شماره ۳۶) توزیع فروانی استفاده از اقوام و دوستان
جدول شماره ۳۷) توزیع فروانی تأمین مخارج زندگی
جدول شماره ۳۸) توزیع فروانی جایگاه نظر خواهی در خانواده
جدول شماره ۳۹) توزیع فروانی جنبه‌های نظر خواهی از فرزندان
جدول شماره ۴۰) توزیع فروانی قابل اجرا بودن تصمیمات فرزندان
جدول شماره ۴۱) توزیع فروانی میزان پی‌گیری والدین از عملکرد تحصیلی فرزندان (پدر)
جدول شماره ۴۲) توزیع فروانی میزان پی‌گیری والدین از عملکرد تحصیلی فرزندان (مادر)
جدول شماره ۴۳) توزیع فروانی محیط گرم و عاطفی خانواده
جدول شماره ۴۴) توزیع فروانی توجه به مشکلات روحی و جسمی فرزندان
جدول شماره ۴۵) توزیع فروانی داشتن اطاق خصوصی و …
جدول شماره ۴۶) توزیع فروانی کمک از مشاوران درسی
جدول شماره ۴۷) توزیع فروانی تأثیر عدم امکانات رفاهی در …
جدول شماره ۴۸) توزیع فروانی درس خواندن در رشته تضمین شغل
جدول شماره ۴۹) توزیع فروانی بیزاری از رشته فاقد شغل
جدول شماره ۵۰) توزیع فروانی اختلاف با پدر
جدول شماره ۵۱) توزیع فروانی اختلاف با مادر
جدول شماره ۵۲) توزیع فروانی اختلاف با برادر و خواهر
جدول شماره ۵۳) توزیع فروانی ضرورت درس خواندن
جدول شماره ۵۴) توزیع فروانی امیدواری به آینده شغلی
جدول شماره ۵۵) توزیع فروانی امیدواری به آینده شغلی
جدول شماره ۵۶) توزیع فروانی رابطه صمیمانه و عاطفی با پدر
جدول شماره ۵۷) توزیع فروانی رابطه صمیمانه و عاطفی با مادر
جدول شماره ۵۸) توزیع فروانی رابطه صمیمانه و عاطفی با برادر و خواهر
ب) نتایج استنباطی: فهرست نمودار و جداول نتایج استنباطی
جدول شماره ۵۹) سطح تحصیلات خانواده و افت تحصیلی فرزندان
جدول شماره ۶۰) پایگاه اجتماعی - اقتصادی و افت تحصیلی فرزندان
جدول شماره ۶۱) عدم توجه کلی به فرزند در خانواده و افت تحصیلی دانش‌آموزان
جدول شماره ۶۲) کنترل درسی فرزند از سوی والدین و افت تحصیلی دانش‌آموزان
جدول شماره ۶۳) نگرش فرد نسبت به اینده شغلی خود و افت تحصیلی
جدول شماره ۶۴) امکانات تحصیلی فرزندان در خانواده و افت تحصیلی دانش‌آموزان
جدول شماره ۶۵) گسیختگی روابط عاطفی در خانواده با افت تحصیلی دانش‌آموزان -
جدول شماره ۶۶) سطح تحصیلات خانواده و عدم توجه کلی به فرزند