دستگاه­های مورد استفاده در این تحقیق به صورت زیر می­باشد:
انکوباتور شیکردار مدل INFORS FG, Eittergasse 27 , CH-4103 Bottmingen
دستگاه انکوباتور مدل Memmert
هود لامینار مدل BEASAT-BSC126
دستگاه اسپکتوفوتومتر مدل Varian cary 50 UV- visible
آون Binder
ترازوهای معمولی و دیجیتال مدل Mehlern Toledo
بن­ماری Memmert
ورتکس
اسپین
هیتر Heidolph, (Heater stirrer)
الکتروفورز
PCR ترموسایکلر مدل Hielscher
Gel doc مدل Cyngene
PH متر
سانتریفیوژ مدل NAPCO-2028R
وسایل دیگر آزمایشگاهی که در این تحقیق مورد استفاده قرار گرفتند شامل موارد زیر می باشند:
میکروتیوپ، فالکون، سمپلر، سر سمپلر،پتری دیش، ارلن، بشر، استوانه مدرج، لوله آزمایش، شیشه­های درب آبی، قاشقک، لوپ،مگنت
استخراج کوتین
در اولین مرحله شناسایی گونه­ های تولید­کننده آنزیم کوتیناز، نیاز به تهیه سوبسترای کوتین می­باشد. با توجه به عدم در دسترس بودن کوتین در بازار لازم بود که آن را از میوه­ ها تهیه کنیم. به این منظور میوه­های سیب قرمز، سیب زرد، گوجه­ فرنگی و خیارسبز از سوپرمارکت خریداری شدند. میوه­ ها شست­و­شو داده و وزن گردیدند آنگاه پوست میوه­ ها را جدا کرده و بعد از وزن کردن پوست میوه­ ها، آنها را در بافر اگزالات (۲گرم اگزالیک اسید، ۸گرم آمونیوم اگزالات، ۵۰۰ میلی لیتر آب) به مدت ۴ ساعت جوشانده شد تا پالپ­ها کاملا جدا شوند پوست­ میوه­ ها را فیلترکرده و با آب مقطر شست­و­شو داده و وزن کرده و سپس پوست­ها را در آون ۴۰ درجه سانتیگراد خشک کرده و آسیاب می­کنیم. پودر بدست آمده را در محلول کلرفرم متانول به نسبت۲ به ۱ (۶۰ میلی­لیترکلروفرم، ۳۰ میلی­لیتر متانول) می­ریزیم و به مدت ۱۲ تا ۲۴ ساعت روی شیکر قرار می­دهیم و سپس به محلول بدست­آمده آب اضافه کرده و در دستگاه سانتریفیوژ با دور ۱۲۰۰۰ و به مدت ۱۵ دقیقه سانتریفیوژ شدند سه فاز در این حالت تشکیل می­ شود که فازهای رویی را دور ریخته سپس فاز زیری را جدا می­کنیم. فاز زیری را درون پتری ریخته و پتری را در آون ۸۰ درجه سانتیگراد خشک می­کنیم. پودر بدست آمده همان کوتین است [۵۶].
نمونه برداری
نمونه­های قارچی و باکتریایی از پوست میوه و خاک باغچه (مرطوب و از برگ­های در حال تجزیه) نمونه معمولی خاک سطح برگ یا میوه­های مشکوک به آلودگی توده­ی باکتری ، ورمی­کمپوست جمع­آوری شد.
غربالگری و جداسازی گونه­ های تولیدکننده آنزیم کوتیناز
به منظور غربالگری و جداسازی سریع نمونه­های تولید کننده آنزیم کوتیناز از محیط کشتی باید استفاده گردد که کوتین تنها منبع کربن آن برای استفاده میکروارگانیزم­ها باشد و تنها میکروارگانیزم­هایی در این محیط رشد کنند که قادر به تجزیه کوتین باشند.

این محیط کشت حاوی ترکیبات زیر است:
۰۳/۰ گرم سدیم­کلرید، ۰۳/۰ گرم آهن­نیترات، ۰۳/۰گرم پتاسیم­کلرید، ۵/۰ گرم آمونیوم­کلرید، ۰۱/۰ گرم آهن­سولفات، ۰۶/۰ گرم پتاسیم­دی­هیدروژن فسفات، ۰۲/۰ گرم منیزیم­سولفات. این مواد را در ۱۰۰ میلی لیترآب حل کرده سپس pH محیط را به ۲/۷ رسانده و به آن ۴/۰ گرم کوتین اضافه کرده و اتوکلاو شد[۵۷].
بدین منظور در ۹ فالکون در هر کدام ۱۰ میلی لیتر از محیط کشت تهیه شده در مرحله قبل ریخته و به صورت زیر کشت می­دهیم. در یکی از محیط کشت­ها چیزی کشت ندادیم و به عنوان نمونه شاهد قرار دادیم، در محیط کشت شماره یک ۱/۰ گرم از خاک باغچه ریختیم، درمحیط کشت شماره دو ۱/۰گرم خاک کمپوست، در محیط کشت شماره سه ۱/۰ گرم خاک باغچه ( پای درخت توت)، در محیط کشت شماره چهار ۱۸/۰ گرم از ناحیه­ی آلوده پوست سیب قرمز، درمحیط کشت شماره پنج ۳۵/۰گرم از ناحیه­ی آلوده­ی پوست سیب­زرد، در محیط کشت شماره شش هم۶۴/۰گرم پوست گوجه آلوده، در محیط کشت هفت ۵۹/۰ گرم از پوست آلوده به میکروب سیب زرد و درمحیط کشت شماره هشت ۱۴/۰گرم از پوست آلوده­ی سیب زرد کشت دادیم. سپس نمونه­ها به مدت ۳ تا ۵ روز در شیکرانکوباتور با دمای ۳۰ درجه وrpm 150 قرار داده شد [۸۳].
بعد از رشد کردن اولیه نمونه­ها نیاز به غربالگری آنها در روی محیط کشت جامد می­باشد. محیط کشت جامد حاوی ترکیبات زیر است:
۰۳/۰ گرم سدیم­کلرید، ۰۳/۰ گرم آهن­نیترات، ۰۳/۰ گرم پتاسیم­کلرید، ۵/۰ گرم آمونیوم­کلرید، ۰۱/۰ گرم آهن­سولفات، ۰۶/۰ گرم پتاسیم­دی­هیدروژن­فسفات، ۰۲/۰گرم منیزیم­سولفات و ۵/۳ گرم آگار را در ۱۰۰ میلی لیترآب حل کردیم. سپس pH محیط به ۲/۷ رسانده شد، به آن ۴/۰ گرم کوتین اضافه کردیم و محیط حاصل اتوکلاو گردید و بین پلیت ها تقسیم گردید. ۲۰میکرولیتر از هر محیط کشت مایع را در زیر هود در هر پلیت تلقیح کرده و بعد به انکوباتور ۳۰ درجه منتقل گردیده شد.
به دلیل اینکه نمونه­های کشت داده شده و رشد کرده خالص نبودند، برای تخلیص نمونه­ها، کلنی­های رشد کرده به پتری­های دیگر حاوی محیط کشت انتقال دادیم. بعد از رشد مناسب سویه­ها، پلیت­های موردنظر تا زمان ساخت اسلنت در یخچال ۴ درجه نگهداری می شود. سپس هر سویه را به یک slant برای نگهداری به یک محیط کشت مایع برای سنجش فعالیت کوتیناز انتقال دادیم. بعد از رشد نمونه­ها یک تک کلنی را برداشته و در محیط کشت مایع درون فالکون تلقیح داده شد و به مدت ۳ تا ۴ روز درون انکوباتور شیکردار با دور ۱۵۰ دور در دقیقه و دمای ۳۰ درجه سانتیگراد تیمار گردید. ۴ گرم نوترینت اگار را در ۲۰۰ میلی لیتر اب حل می­کنیم اتوکلاو می­کنیم سپس بین پتری­ها تقسیم می­کنیم و سپس باکتری­ ها را انتقال می­دهیم. از این پتری­ها نمونه­ها را به اسلند انتقال می­دهیم.
تهیه slant از سویه­های جدا شده
یک کلنی خاص از سویه­های جداشده را بر روی محیط اسلنت انتقال داده و بعد از انکوباسیون اسلنت­ها به مدت ۴۸ ساعت، آنها در یخچال و دمای ۴ درجه نگهداری می­شوند. اسلنت­ها را هم به مدت ۴۸ ساعت (تا زمانی که رشد کنند) در انکوباتور قرار دادیم. ۱۵۰ میلی­لیتر آب را و ۳ گرم نوترینت اگار را در بشر با حرارت ملایم حل می­کنیم و در هر لوله ۱۵ میلی­لیتر می­ریزیم بعد پنبه می­گذاریم و اتوکلاو می­کنیم بعد به صورت کج می­گذاریم تا ببندد و بعد از بستن و سرد شدن و یک کلنی خاص از سویه­های جداشده را بر روی محیط اسلنت انتقال داده و بعد از انکوباسیون اسلنت­ها به مدت ۴۸ ساعت، آنها در یخچال و دمای ۴ درجه نگهداری می­شوند. Slant ها را هم به مدت ۴۸ ساعت (تا زمانی که رشد کنند) در انکوباتور قرار دادیم. (slant به مدت یک ماه قابل نگهداری است).
نگهداری طولانی مدت سویه­ها
به منظور نگهداری طولانی مدت سویه­ها، ابتدا محیط کشت مایع نوترینت براس یا LB تهیه نموده و سویه­ها را در آن تلقیح کرده و در شیکر انکوباتور به مدت ۲۴ ساعت به منظور رشد بهینه قرار داده می­ شود سپس ۷۶۰ میکرولیتر از محیط کشت حاوی باکتری و ۷۶۰ میکرولیتراز گلیسرول ۴۰% به میکروتیوب­های ۵/۱ میلی لیتری انتقال داده و به مدت چند دقیقه به آرامی تکان داده می­ شود و در فریزر۸۰- برای طولانی مدت نگهداری می­ شود.
تهیه گلیسرول
۲۰۰ میکرولیتر گلیسرول و ۸۰۰ میکرولیتر آب مقطر را بهم افزوده و گلیسرول ۲۰% تهیه می شود.
تهیه محیط کشتLB
۵ گرم y(مخمر)
۱۰ گرم T(تریپتون)
۵ گرم nacl
این سه ماده را به هم اضافه نموده و آب مقطر به حجم یک لیتر اضافه می­ شود و اتوکلاو می­ شود.
محیط کشت LB را بعد از اتوکلاو در هر فالکون ۵ میلی­لیتر می­ریزیم و نمونه را به آن انتقال می­دهیم. سپس به مدت ۱۲ تا ۲۴ ساعت در انکوباتور می­گذاریم. بعد فالکون­های حاوی محیط کشت LB و نمونه را با rpm 4000 و به مدت ۵ دقیقه سانتریفیوژ می­کنیم.
۲ میلی­لیتر از محلول رویی را بیرون می­ریزیم و ۳ میلی­لیتر باقی مانده را پیپتاژ می­کنیم. بعد درون هر ویال ۶۰۰ میکرولیتر از محلول پیپتاژ شده و ۴۰۰ میکرولیتر محلول گلیسرول ۵۰ درصد می­ریزیم و به مدت چند دقیقه به آرامی تکان داده می شود بعد در یخچال ۸۰- درجه نگهداری می­کنیم.
Assay آنزیمی
به منظور assay یا سنجش فعالیت آنزیمی از تکنیک طیف­سنجی یا روش اسپکتروفتومتری استفاده می­ شود. سیستم اسپکتروفتومتر نور ثابت با طول موج دلخواه به وجود می ­آورد. پس از عبور نور از محلول، نور باقیمانده به قسمت نورسنجی یا فوتومتر می­رود. فوتومتر از نوع فتومولتی پلایر تیوب، فوتو دیود و… نور را به سیگنال الکتریکی تبدیل می­ کند. سپس سیگنال­های دریافت شده اندازه ­گیری و پردازش می­شوند تا کمیت مورد نظر به دست آید. خروجی اسپکتروفوتومتر همیشه نموداری از شدت نور نسبت به طول موج است. داده­هایی که برای تولید نمودار گردآوری شده، در جدولی از شدت نور و طول موج ذخیره می­ شود. مقدار گراف بیان کننده مقدار عبور یا مقدار جذب است. اسپکتروفوتومترهای امروزی دیجیتالی بوده و به وسیله میکروپروسور کنترل می­شوند. از این دستگاه برای اندازه ­گیری غلظت ماده رنگی محلول­ها، به طور مثال اندازه ­گیری قند، اسید اوریک، کلسترول، آنزیم­ های مختلف و… استفاده می­ شود. این دستگاه قابلیت اندازه ­گیری نمونه­های فوق العاده کوچک را داشته لذا از آن برای تجزیه و تحلیل عناصر مولکول های RNA، استفاده می­ شود.

تسریع در ارائه خدمات مورد نظر مشتری

صحت خدمات (Accuracy)

درستی نتایج کارهای انجام شده و جلوگیری از اشتباهات مکرر

شکل ظاهری (Personal Characteristics)

مقبولیت فرآورده برحسب نوع خدمت

رفتار مناسب (Courtesy)

ارائه خدمات با رفتار مشتری مدارانه

قانونمندی (Legal Actions)

پایبندی کارکنان به قوانین و ضوابط و عدم تبعیض بین مشتریان

• بازاریابی اینترنتی

اینترنت به عنوان پدیده ای که مرکب از سخت افزار (مجموعه ای از رایانه های الکترونیکی که به صورت شبکه با هم در ارتباط هستند) و نرم افزار (وب جهانشمول) می باشد ویژگیهای خاصی دارد که امکان ایجاد همگرایی بین دو روند توسعه اطلاعات و توسعه فناوری ارتباطات را ایجاد کرده است. برای درک آنچه این رسانه به عنوان محور تحولات نوین فناوری اطلاعات ایجاد کرده، ضروری است مراحل توسعه آن و کاربردهایش مورد مداقه قرار گیرند. اینترنت از سال۱۹۶۵ تاکنون ۶ مرحله توسعه را گذرانده، به طوریکه از یک وسیله جدید تکنولوژیک با استفاده های خاص در مرحله اول، به رسانه ای چند منظوره، با فراگیری جهانی و قابلیت‌های منحصر به فرد تبدیل شده است.

اینترنت از مهمترین و بحث برانگیزترین موضوعات در تجارت و آموزش بازرگانی است. سرعت توسعه بازاریابی الکترونیکی بسیار بالا است، به طوری که با کندی تحقیقات و انتشار نتایج آن همسنگ نیست. مشخص است که بنیادهای تجاری به سرعت در حال تحول واستقرار در نقاط پویای جدید است و لذا اینترنت را باید از پردامنه ترین رسانه ها دانست که تغییرات بیشماری را در حوزه بازاریابی و توسعه ایجاد کرده است. این قابلیت‌ها بسیاری از حوزه ها را در بازاریابی تحت تأثیر قرار داده است: بخش بندی و هدفگذاری، قیمتگذاری، خدمات به مشتری و مدیریت روابط مشتری، بسته بندی، ارتباطات بازاریابی، پیشبرد، کانال توزیع و زنجیره ارزش ، بازاریابی جهانی و علامت تجاری.
۱-۱۰-ساختار ارائه نتایج پایان نامه

• فصل اول: کلیات تحقیق

این فصل شامل بیان مسئله، ضرورت انجام تحقیق، اهداف و فرضیه های پژوهش، تعریف متغیر ها و پیش فرضهای پژوهش و تعریف اصطلاحات است.

• فصل دوم: ادبیات و پیشینه پژوهش

مروری بر مطالعات به منظور دستیابی به فاکتور های بازاریابی اینرنتی است که محققین می توانند درک کنند در این زمینه چه کارهایی انجام شده و چه اطلاعاتی در این زمینه وجود دارد وآنها باید از کجا شروع کند و یا چه کاری و چگونه کار را انجام دهد . در حقیقت مروری بر مطالعات خلاصه ای از نکات اصلی، نتیجه گیری عمومی و خلاء موجود در مطالعات و کاربرد در تحقیق می باشد.

• فصل سوم: روش پژوهش

این فصل شامل نوع پژوهش، جامعه پژوهش، محیط پژوهش، نمونه پژوهش، روش نمونه گیری، حجم نمونه و روش محاسبه آن، مشخصات واحد پژوهش و معیارهای ورود و خروج مطالعه، توضیح ابزار گردآوری اطلاعات و روایی و پایایی ابزار، روش گردآوری اطلاعات، روش تجزیه و تحلیل داده ها، محدودیت های پژوهش و ملاحظات اخلاقی است.

• فصل چهارم: نتایج

این فصل شامل بیان نتایج حاصل از تحقیق است. مطالب این بخش تنها بر اساس یافته های حاصل از پژوهش تنظیم می گردد و شامل اطلاعات نوشتاری، جداول و نمودارها می باشد این فصل به بیان یافته ها اختصاص دارد نه تفسیر آنها لذا صرفا نتایج به ترتیب منطقی و متناسب با اهداف و فرضیاتی که بیشتر در پروپوزال طراحی شده بود بیان می گردد.

• فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری

این فصل شامل بحث، تفسیر، نتیجه گیری، جمع بندی و پیشنهادات است . قسمت اول بحث پاسخ به سؤالات پژوهش است سپس نتایج با یافته های دیگر محققین مقایسه می گردد و دلایل تفاوت ذکر می شود. در این فصل یافته های مهم و شاخص پایان نامه با دلایل منطقی و علمی اشاره می شود و تنها نتایجی مورد بحث قرار می گیرد که در فصل نتایج به آن اشاره شده است. نتیجه گیری در آخر بحث آورده خواهد شد. در این قسمت نتایج اختصاصی و مهم به صورت دسته بندی در قسمت پیشنهادات به مسائل بی جواب در رابطه با تحقیق انجام شده اشاره می شود و پیشنهاداتی برای تحقیقات بعدی به استناد نتایج بدست آمده در این تحقیق ارائه می گردد. در حقیقت در این بخش زمینه های تحقیقاتی جدید پیش روی محققان گذاشته می شود.
فصل دوم
مبانی نظری پژوهش
۲-۱- مقدمه

۲- سیستم دفاعی میزبان را متوقف کرده و بر غلبه­ قارچ بر دفاع میزبان کمک می­ کنند.
۳- دارای خاصیت آنتی­بیوتیکی بوده و رقابت سایر عوامل بیماری­زا یا فلور ساپروفیت را روی لاشه­ی میزبان متوقف می­ کنند.
۴- برای موجودات قارچ­خوار سمّی بوده و یک مانع دفاعی را در خارج میزبان فراهم می­ کنند.

مطالعات بیماری­شناسی بافتی مشخص کرده است که قارچ­های پست بیمارگر حشرات مانند جنس­های Coelomomyces، Lagenidium و Entomophthora با بهره گرفتن از مواد غذایی موجود در همولنف و به دنبال آن تشکیل کلنی در تمام یا در قسمتی از بدن میزبان بر آن غلبه می­ کنند (اونس^[۶۶]، ۱۹۸۹). در صورتی که این قارچ­ها برای اینکه روی حشرات دارای رشد و نمو سریع یا دارای مرحله­ رشدی کوتاه (مانند شته­ها) بیمارگر باشند، باید رشد و نمو سریعی داشته باشند. اسپورزایی به سرعت پس از مرگ میزبان بروز می­ کند و دوره­ ساپروفیتی بسیارکوتاه بوده و یا وجود ندارد. در تأیید این مطالعات، هیچ متابولیت ثانویه­ی سمّی در کشت­های گونه­ های مختلف Lagenidium، Eryinia، Harposporium و Entomophthora تشخیص داده نشده است (آنک و استرنر^[۶۷]، ۲۰۰۲).
بعضی از انتوموفتورال­های اولیه مانند Conidiobolus spp. ممکن است متابولیت­های ثانویه سمّی را در شرایط آزمایشگاهی تولید کنند (روبرتز، ۱۹۸۰). فریموزر و همکاران (۲۰۰۳ب) در مطالعات EST برای بیان ژن در قارچ C. coronatus، ژن­های اندکی را برای آنزیم­ های سمّی، متابولیت­های ثانویه­ی حشره­کش یا آنزیم­ های سازنده­ی آنتی­بیوتیک پیدا کردند. بر خلاف بسیاری از قارچ­های انتوموفتورال، قارچ­های بیمارگر حشرات از گروه دئوترومیست و آسکومیست تمایل دارند که دامنه­ میزبانی وسیع­تری داشته و میزبان­های خود را به سهولت از بین ببرند. رشد پراکنده­ی قارچ بیمارگر در همولنف قبل از مرگ میزبان، تغییرات در رفتار میزبان مانند کاهش فعالیت، فلج و کاهش تغذیه، تغییرات پاتولوژیک ساختار بافت­های میزبان پیشاپیش هیف­های نفوذ کننده، تسلیم شدن سیستم ایمنی میزبان و کاهش موجودات زنده (رقابت کننده­ها) مدارکی برای دخالت زنده­کش­های مشتق از قارچ­های مذکور در بیمارگری است.
۲-۲-۵-۴- متابولیت­های سمّی قارچ­های بیمارگر حشرات
انواع بسیار متنوّعی از متابولیت­های سمّی به وسیله­ قارچ­های بیماری­زای حشرات از جمله M. anisopliae، M. flavoviride، Hirsutella thompsonii، V. lecanii، Tolypocladium spp.، P. fumosoroseus وB. bassiana تولید می­شوند (چرنلی، ۲۰۰۳). تعدادی از متابولیت­های انتخاب شده برخی از عوامل بیوکنترل قارچی بسیار مهم در ادامه مطلب بیان شده است (جدول ۲-۲).
۲-۲-۵-۵- دستروکسین­ها^[۶۸]:
اولین مطالعه اصولی نحوه تولید توکسین توسط قارچ­های بیمارگر حشرات در شرایط آزمایشگاهی بر روی قارچ M. anisopliae صورت گرفته است که این مطالعه سبب کشف دستروکسین­های آ (شکل ۲-۱) و ب^[۶۹]شده است (کودایرا^[۷۰]، ۱۹۶۱). از آن زمان تاکنون، ترکیبات بسیار زیاد دیگری از این نوع قارچ به دست آمده است (جدول ۲-۲). سوزوکی و همکارانش در سال ۱۹۷۱ برای اولین بار تولید دستروکسین­ها را در بافت­های زنده موجودات به اثبات رساندند. دستروکسین­ها از نطر ساختار، ترکیباتی کاملاً متفاوت از یکدیگر می­باشند که در بیشتر مواقع این ساختارها ایزومر (مشابه) یکدیگر می­باشند. ساختار اصلی تشکیل دهنده آنها شامل پنج نوع اسیدآمینه و آلفا-هیدروکسی­اسید می­باشد. تا امروز، ۲۸ نوع ساختار کاملاً متفاوت از ۳ نوع منبع قارچی مختلف به دست آمده است، که بیشتر این ساختارها مشابه و از قارچ M. anisopliae به دست آمده­اند (استراسر^[۷۱]و همکاران، ۲۰۰۰). سایر آنالوگ­های طبیعی دستروکسین­ها نیز مورد توصیف قرار گرفته­اند، که این آنالوگ­ها شامل روزئوتوکسین^[۷۲](انگستروم^[۷۳]و همکاران، ۱۹۷۵) و بورسفالوسید آ و ب^[۷۴] می­باشند (کاوازو^[۷۵]و همکاران، ۱۹۹۳).
در سال ۱۹۹۶ دستروکسین­های A₄، A₁ و A₅ و هومودستروکسین ب^[۷۶] از قارچ Aschersonia spp. که نوعی قارچ بیمارگر حشرات می­باشد، جداسازی شده ­اند (کراسنوف و گیبسون^[۷۷]، ۱۹۹۶). همچنین دستروکسین ب، هومودستروکسین ب و دسمتیل دستروکسین ب^[۷۸] از قارچ­هایAlternaria brassicae (Berk. ) Sacc.، Trichothecium roseum و Ophiosphaerella herpotricha که نوعی بیمارگر گیاهی می­باشند، جداسازی شده ­اند (گوپتا^[۷۹]و همکاران، ۱۹۸۹).
اطلاعات بسیار اندکی در مورد گروه ­های فعال عملکردی در مولکول­های مختلف دستروکسین وجود دارد (ساختار شیمیایی دستروکسین A در شکل شماره ۱ نشان داده شده است). پیشنهاد شده است که گروه آپوکسی موجود در مولکول دستروکسین ای سبب افزایش و وجود گروه COOH موجود در دستروکسین دی سبب کاهش قدرت کشندگی دستروکسین­ها می­ شود (دوماس^[۸۰]و همکاران، ۱۹۹۴). به نظر می­رسد که دستروکسین­ها طیف وسیعی از فعالیت­های بیولوژیکی را تحت تأثیر قرار می­ دهند، از جمله آنها می­توان اختلال در میزان کلسیم درونی سلول­ها (دوماس و همکاران، ۱۹۹۶)، مهار حفره آدنوزین تری­فسفاتاز^[۸۱](باندانی^[۸۲]و همکاران، ۲۰۰۱) و فعالیت­ ضد ویروسی (چن^[۸۳]و همکاران، ۱۹۹۷) را نام برد.
شکل۲-۱- ساختار شیمیایی دستروکین A(یه^[۸۴]و همکاران، ۱۹۹۶)
جدول شماره ۲-۲- تعدادی از متابولیت­های انتخاب شده برخی از عوامل بیوکنترل قارچی بسیار مهم
(وی^[۸۵]و همکاران، ۲۰۰۱)

Bm قسمت دائم میدان است، که ۹۵% از کل قدرت میدان را در سطح زمین به خود اختصاص می دهد. تغییرات مستقل^[۹] تغیییر آرام در زمان Bm است. میدان ناشی از صخره های کروستال^[۱۰] مغناطیسیBc، نسبت به فضا تغییر میکند ولی با توجه به مقیاس زمانی که در اینجا در نظر گرفته می شود، نسبت به زمان ثابت فرض می شود.

تصویر ۱-۱- شمایی از خطوط میدان مغناطیسی زمین
با توجه به شکل۱-۱ میدان مغناطیسی اصلی ناشی از جریانهای مذاب در لایه بیرونی هسته.خطوط میدان تقریباً غیر قطبی شده، بالای سطح زمین، در جنوبی ترین قسمت همیوسفر به سمت بیرون و در شمالی ترین قسمت آن به سمت داخل هستند.
Bc از نظر مقدار غالباً خیلی کوچکتر ازBm است. میدان کروستال نسبت به مقیاس های زمانی مورد نظر در این مطالعه، ثابت است. میدان ناشی از جریانهای یونوسفر و مگنتوسفیر و جریانهای القایی منتجه آنها در منتل و کراست زمین،Bd، هم نسبت به مکان و هم نسبت به زمان تغییر می کند. WMM فقط میدان مغناطیسی اصلی زمین را نشان می دهدBm)). برای ایجادکردن یک مدل دقیق از میدان مغناطیسی اصلی، لازم است که اطلاعات کافی با یک پوشش جهانی مناسب و حداقل سطح اغتشاشات در دست داشت. مجموعه اطلاعات ماهواره دنیش اورستد^[۱۱] و جرمن چمپ^[۱۲]این نیازمندیها را تامین می کند. هر دو ماهواره اطلاعات برداری و اسکالر دارای کیفیت بالایی را در تمام طول ها و عرض های جغرافیایی تامین می کنند. اما این عمل در طول کل دوره های زمانی مورد نیاز برای مدلسازی انجام نمی گیرد. بر این اساس این اطلاعات ماهواره ای با اطلاعات متوسط ساعتی از پایش زمینی که تقریباً در تمام بازه زمانی مورد دلخواه به صورت پیوسته در دسترس است، دائماً افزایش می یابد. هرچند که فضای پوشش ضعیفی بدست دهد. بدینسان اطلاعات بدست آمده از پایش، قیود با ارزشی را برای زمان تغییر میدان مغناطیسی زمین فراهم می کنند. استفاده همزمان از اطلاعات بدست آمده از پایش زمینی و همچنین اطلاعات دریافتی از ماهواره، یک مجموعه اطلاعات دارای کیفیت قابل قبول برای مدلسازی رفتار میدان مغناطیسی اصلی نسبت به زمان و مکان برای ما تامین می کند.

Bc دارای تغییرات فضایی در دامنه چندین متر تا چندین هزار کیلومتر است و نمی توان آن را با مدل های هارمونیک کروی دارای درجه پایین، به طور کامل مدل کرد. بر همین اساس، WMM شامل تاثیر هم مرز^[۱۳] کراستنیست جز برای آن قسمت با طول موج بسیار بالا.Bc عموماً در دریا کوچکتر از خشکی است و با افزایش ارتفاع، کاهش می یابد. مغناطیسی شدن صخره در اثرBc، می تواند یا به صورت القایی(بوسیله میدان مغناطیسی اصلی) یا دائمی و یا یک ترکیب از هر دو باشد.
اصل این پدیده این است که جو در نور روز در ارتفاع های ۱۰۰-۱۳۰ کیلومتر ، در اثر تشعشع خورشید یونیزه شده و توسط باد و جزر و مد در میدان اصلی زمین به حرکت در می آید و بدینسان شرایط لازم برای فعالیت یک دینام (حرکت یک هادی در یک میدان مغناطیسی) فراهم می شود. دیگر تغییرات روزانه و سالیانه، در اثر چرخش زمین در میدان مگنتوسفر خارجیدر یک مرجع خورشید آهنگ ایجاد می شود. تغییرات بی قاعده ناشی از توفان های مغناطیسی و ریز توفانها^[۱۴] است. توفانهای مغناطیسی در حالت کلی دارای سه فاز هستند: فاز اولیه – اغلب همراه با یک شروع ناگهانی^[۱۵] و افزایش میدان افقی در عرض های جغرافیایی میانی -یک فاز اصلی و یک فاز احیاء. فاز اصلی حاوی یک تشدید^[۱۶] از جریان حلقه(شکل۱-۲) از صفحه پلاسما است.

تصویر ۲- شمای جریان پلاسما در اطراف زمین
در شکل۱-۲ سیستم جریان مگنتوسفری(قرمز) یک میدان مغناطیسی تقریبا یکنواخت، نزدیک به زمین تولید می کند. جریانهای همخط با میدان (زرد)، جریانهای مگنتوسفری را با جریانهای یونوسفر نزدیک زمین جفت می کنند. [افتر کیولسون و راسل ۱۹۹۵]
در طول فاز احیاء، جریان حلقه به حالت نرمال در مدت چند روز و ریز توفانهای زیر مجاور^[۱۷] مرتبط باز می گردد. طوفان مغناطیسی و اثرات ریز توفانها در عرض جغرافیایی بزرگ مغناطیس زمین عموماً شدیدتر هستند. چرا که در آنجا، منطقه یونیزه قسمتهای بالایی جو(یونوسفر)توسط جریانهای هم خط میدان^[۱۸]، با مگنتوسفیر جفت شده اند و در نتیجه بشدت از میدان مغناطیسی درون سیاره ای^[۱۹] و سیستم های جریان در دنباله مغناطیسی^[۲۰] تاثیر می پذیرند. هم تغییرات میدان مزاحم با قاعده و هم بی قاعده، هر دو با فصل و چرخه فعالیت مغناطیسی خورشید مدوله می شوند. میدان مزاحم اولیه اغلب به عنوان میدان خارجی شناخته می شود، چراکه منابع اصلی آن-یونوسفر و مگنتوسفر-خارج از سطح زمین که اندازه گیریهای مغناطیس زمین به صورت سنتی در آن انجام می شود، هستند. با اینحال این جمله می تواند گمراه کننده باشد و در هنگام استفاده از داده های ماهواره ای از آن صرفنظر می کنیم. چرا که یونوسفر پایین تر از ارتفاعی قرار دارد که این اطلاعات می آیند و بر همین اساس به صورت کامل در بطن این سطح پایش قرار گرفته است. برای اطلاعات بیشتر در مورد کراستال و میدانهای مزاحم (و اطلاعات کلی راجع به مغناطیس زمین) مریل و همکاران ۱۹۹۶ و پارکینسون۱۹۸۳ را ببینید.
بردار میدان مغناطیسی زمین B با ۷ جزء مشخص می شود. این اجزاء عبارتند از:
– مولفه های قائمX (با شدت شمالی )
Y (با شدت شرقی)
Z (شدت عمودی-مثبت به سمت پایین)
F شدت کل، Hشدت افقی
I شیب مغناطیسی (زاویه میل^[۲۱]، زاویه بین صفحه افقی و بردار میدان-مثبت اندازه گیری به سمت پایین)
D انحراف مغناطیسی(زاویه انحراف^[۲۲]، زاویه افقی بین شمال حقیقی و بردار میدان- راستای مثبت اندازه گیری به سمت شرق).
GV، تغییرات شبکه
را می توان از روی مولفه های قائم با بهره گرفتن از رابطه های ۱-۱۶به دست آورد. جدول ۲دامنه مقادیر مورد انتظار برای مولفه های مغناطیسی و GV در سطح زمین را نشان می دهد.
WMM برای ۲۰۰۵ تا ۲۰۱۰ یک مدل از میدان اصلی کروی-هارمونیک با درجه و مرتبه ۱۲ برای ۲۰۰۵ را با یک مدل متغیر پیشگوی مستقل کروی-هارمونیک با درجه و مرتبه ۸ برای دوره ۲۰۰۵ تا ۲۰۱۰ مقایسه می کند.
مدل برنامه کامپیوتری در نظر گرفته شده، مولفه های X،Y ،Z ،F ،D ، I،H و GV در مختصات زمین شناختی^[۲۳]را محاسبه می کند.

مراحل شناسایی خرابی در سازه‌ها با به کار گیری جواب‌های محدوده زمان و روش بهینه‌سازی تکامل تفاضلی به‌صورت زیر انجام می‌شه:
قدم اول : اعمال یه، بار ضربه­ای به سازه برابر شکل (‏۳-۷ ). البته در کد­های برنامه نویسی برنامه قادر به دریافت هر نوع بار دلخواهیه.
شکل ‏۳‑۷ بار وارد شده به سازه
قدم دوم : تحلیل سازه آسیب‌دیده با به کار گیری راه نیومارک و استخراج شتاب سازه در دو نقطه دلخواه برابر شکل (۳-۸) واسه یه تیر طره ای برابر معادله (۳-۵) شتاب در نقاط (۱) و (۲) بدست می ­آید.
شکل ‏۳‑۸ نیروی اعمالی و شتاب‌های به‌دست‌اومده
قدم سوم : تشکیل پیرو هدف تشکیل شده از جواب شتاب سازه در حالت خراب و شتاب مدل تحلیلی برابر معادله (۳-۲۰)
قدم چهارم : دست کم کردن پیرو هدف تشکیل شده در قدم قبل با به کار گیری الگوریتم بهینه‌سازی تکامل تفاضلی و تعیین محل و اندازه خرابی

فصل چهارم : مثالای عددی و تجزیه وتحلیل یافته های

مقدمه

در این فصل کارایی روش پیشنهادی واسه شناسایی خرابی سازه های موردمطالعه قرار می­گیرد. تعدادی سازه استانداردکه از مقالات بین المللی گرفته شده تجزیه وتحلیل و یافته های اون با جداول ونمودارهای مربوطه نشون داده می‌شه. در واقع در این بخش سرعت ودقت الگوریتم که واسه اولین بار واسه شناسایی خرابی سازه های مورداستفاده قرارگرفته، مورد بحث قرارمی گیرد. سازه‌های مورد بررسی در این فصل شامل تیرطره ۱۵ المانی، تیرطره ۲۰ المانی، تیرساده ۲۴ المانی و قاب ۱۵ المانیه. درهرکدام از این سازه ها موارد جور واجور خرابی تعریف شده و یافته های عددی اون درجداول جدا از هم آورده شده. هم اینکه با در نظر گرفتن شلوغی (۳%) نویز بر سازه­ها، کارایی بالای الگوریتم پیشنهادی نشون داده شده و در آخر تحلیل پارامتریک پارامترهای تحلیلی و الگوریتم بهینه‌سازی بررسی می­شه. الگوریتم پیشنهادی مانند بقیه الگوریتمای بهینه‌سازی دارای یه سری عامل مختلفه. در انتهای هر بخش، یکی از پارامترهای الگوریتم مورد بررسی قرارمی­گیرد تا اثر عامل ذکرشده در چگونگی بهینه‌سازی نشون داده شه. البته اینم بگیم که اعداد در نظر گرفته شده واسه هر پارامترپس ازآزمون و خطاهای بسیار به‌دست‌اومده تا این الگوریتم بهترین کارکرد رو واسه رسیدن به جواب داشته باشه. شناسایی خرابی در سازه جور واجور با به کار گیری الگوریتم و پیرو هدف در این بخش آورده شده.

بررسی یافته های عددی بدون درنظرگرفتن اثر نویز

تیر طره ۱۵ المانی

مدل اجزاء محدود یه تیر طره ۱۵ المانی [۴۲] جهت بررسی صحت کارکرد روش پیشنهادی در(شکل ‏۴‑۱) مشاهده می­شه. مدول الاستیسیته سازه و جرم واحد حجم اون برابر با هستش. طول تیر () برابر با ۲٫۷۴ m، ضخامت مقطع تیر () برابر با۰٫۰۰۶۳۵ و عرض مقطع تیر () برابر با۰٫۰۷۶ه. آسیب‌دیدگی درالمان­های سازه با کم شدن مدول الاستیسیته اون‌ها مدلسازی می‌شه. جهت بررسی صحت کارکرد روش‌ پیشنهادی، سه حالت آسیب‌دیدگی متفاوت مندرج در جدول (‏۴-۲) به سازه اعمال و یافته های مربوط به هر حالت ارائه می‌شه. با فرض ضریب میرایی۵ درصد و بهینه سازی تا وقتی ادامه می­یابد که تعداد کل تکرارا به برسه یا مقدار پیرو هدف بعد از ۱۰۰ تکرار متوالی تغییر محسوسی نیابد. فاکتورهایی لازم واسه بهینه سازی برابر جدول(۴-۱) است.
جدول ‏۴‑۱ پارامترهای مورد نیازبرای بهینه‌سازی

جدول ‏۴‑۲ حالتای آسیب‌دیدگی اعمال‌شده به تیر طره ۱۵ المانی